pUC118 EcoR I/BAP
使 用 说 明 书
●纯 度
1. 用1% Agarose电泳，显示单一条带。 2. 使用T4 DNA连接酶对pUC118 EcoR I/BAP
进行自身连接时的转化效率是未切断pUC118 转化效率的1%以下。
3. 使用T4 Polynucleotide Kinase将pUC118 EcoR
I/BAP的5’-OH末端磷酸化后，再使用T4 DNA Ligase进行自身连接，然后转化至E.coli JM109 Competent Cell（转化效率为：1×107 Colonies/1 μg pUC118）时，其转化效率在1×106 Colonies/1 μg DNA以上，此时在含有IPTG、X-Gal的蓝白筛选平板培养基上的白色菌落数在1%以下。
●TaKaRa Code ：D3320
●包 装 量：5 μg（0.1 OD）
●浓 度：50～100 μg/ml
●制品说明
pUC118 EcoR I/BAP 载体是由pUC118 DNA经其多克隆位点上的酶EcoR I酶切后，用E.coli来源的碱性磷酸酶（BAP）去磷酸化后得到的。这种经BAP处理过的载体可以防止自身环化，转化时可以降低含有空载体的转化细胞数量。这种载体使用前不需要任何处理，可直接用于克隆。
●贮存溶液
10 mM Tris-HCl（pH8.0），1 mM EDTA。
●使 用 例
pUC118 EcoR I/BAP DNA Fragment/EcoR I TE Buffer 50 ng（25 fmol） 25 fmol-250 fmol up to 5 μl
●保 存：
●制 备
-20℃
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化的pUC118 DNA，经酶EcoR I消化后，再使用E.coli来源的碱性磷酸酶（BAP）进行了去磷酸化处理。
Solution I 5 μl。* 16℃ 30分钟。 进行细菌转化 * DNA Ligation Kit Ver.2.0 (TaKaRa Code：D6022）
●链 长
3,162 bp（Messing等构建方法的计算值）。
●参考文献：
Vieira, J. and Messing, J. (1987) Methods in
●GenBank登录号
pUC118：Accession No. U079
Enzymolgy, 153, 3-11.
pUC118多克隆位点图
V2010.04
