・１６・ 中国现代医药杂志２０１１年１月第１３卷第１期ＭＭＪＣ，Ｊａｎ ２０１１，Ｖｏｌ １３，Ｎｏ．１ 硫酸镁对兔蛛网膜下腔出血后血管痉挛的防治效果 郭伟 王业忠 赵冬 李令建 【摘要】 目的 探讨药物硫酸镁对蛛网膜下腔出血后血管痉挛的影响。方法新西兰大白兔１２只．枕大池二次注血 法建立蛛网膜下腔出血模型，经ＴＣＤ检测筛选出发生血管痉挛８只，随机分为硫酸镁组（ＭｇＳＯ 组）与生理盐水组ｆＮａＣｌ 组），按时间点再分为１ｄ、３ｄ、５ｄ、７ｄ、１４ｄ，５亚组（ｎ＝４），观察各亚组实验兔神经行为学评分变化，运用经颅多普勒（ＴＣＤ）对各 亚组实验兔基底动脉（ＢＡ）血流速率进行检测。结果３ｄ起ＭｇＳＯ 组较ＮａＣ１组神经行为学测定评分减轻 ０．０５），硫酸镁 组的ＢＡ平均速率３ｄ起较生理盐水组减轻ｆ尸＜０．０５），７ｄ时最具显著性ｆＰ＜０．Ｏ１１。结论硫酸镁药物可缓解蛛网膜下腔出血 后血管痉挛。 【关键词】 硫酸镁 蛛网膜下腔出Ｉｆ＝ＩＬ 血管痉挛神经行为学评分经颅多普勒 Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ ｏｎ ｖａｓｏｓｐａｓｍ ａｆｔｅｒ ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ｉｎ ｒａｂｂｉｔ Ｇｕｏ Ｗｅｉ，Ｗａｎｇ Ｙｅｚｈｏｎｇ，Ｚｈａｏ Ｄｏｎｇ，ｅｔ ａ１．Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＳｈｉｈｅｚｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｈｅｚｉ ８３２０００ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ ｏｎ ｔｈｅ ｖａｓｏｓｐａｓｍ ａｆｔｅｒ ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａｆｔｅｒ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ ａｒｔｅｒｉａｌ ｂｌｏｏｄ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｃｉｓｔｅｒｎａ ｍａｇｎａ ｔｗｉｃｅ，８ ｅｘａｍｉｎｉｎｇ Ｖａｓｏｓｐａｓｍ ｗｉｔｈ ＴＣＤ ｉｎ １２ Ｎｅｗ Ｚｅａｌａｎｄ ｗｈｉｔｅ ｒａｂｂｉｔｓ ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｒａｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ．ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ—ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓａｌｉｎｅ－ ｇｒｏｕｐ，ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｅ％ｕａｌｌｙ ａｓｓｉｇｎｅｄ ｉｎｔｏ ５ ｓｕｂｇｒｏｕｐｓ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｉｍｅ ｐｏｉｎｔｓ １ｄ，３ｄ，５ｄ，７ｄ，１４ｄ（ｎ＝４）．Ｏｎ １ｄ，３ｄ，５ｄ，７ｄ，１４ｄ ｏｂｓｅｒｖｅｄ Ｎｅｕｒｏｅｔｈｏｌｏｇｉｃ ｓｃｏｒｅ ａｎｄ ａｓｓｅｓｓｅｄ ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ ｂａｓａｌ ａｒｔｅｒｙ ｏｆ ｒａｂｂｉｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｎｅｕｒｏｅｔｈｏｌｏｇｉｃ ｓｃｏｒｅ ｏｆ ｒａｂｂｉｔ ｉｎ ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ—ｇｒｏｕｐ ｂｅｇｉｎ ｔｏ ｂｅ ｓｌｏｗｅｒ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｓａｌｉｎｅ—ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５），ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｂｌｏｏｄ ｌｆｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ ｂａｓａｌ ａｒｔｅｒｙ ｉｎ ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ—ｇｒｏｕｐ ｏｎ ３ｄ ｂｅｇｉｎ ｔｏ ｂｅ ｓｌｏｗｅｒ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｓａｌｉｎｅ—ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５），ｉｔ ｗａｓ ｄｅｃｒｅｓｅｄ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｏｎ ７ｄ（ ０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ ｃａｎ ｒｅｌｉｅｖｅ Ｖａｓｏｓｐａｓｍ ｏｆ ｂａｓａｌ ａｒｔｅｒｙ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ Ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ Ｖａｓｏｓｐａｓｍ Ｎｅｕｒｏｅｔｈｏｌｏｇｉｃ ｓｃｏｒｅ Ｔｒａｎｓｃｒａｎｉａｌ ｄｏｐｐｌｅｒ 脑血管痉挛ｆｃｅｒｅｂｒａｌ ｖａｓｏｓｐａｓｍ，ｃｖｓ）是蛛网膜 立模型．采用耳缘静脉缓慢静推０．０２ｇ・ｍｌ ・ 下腔出血ｆｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ＳＡＨ）后常见的 ｋｇ～，后芬太尼０．Ｏｌｇ・ｍｌ ・ｋｇ 缓慢静推，建立静脉通 并发症之一，发生率可达６０％～７０％，严重影响患者 道，根据兔子的麻醉程度可追加０．０２～０．０４ｇ 的预后和生存质量ｌ１ｌ。最近的临床研究表明硫酸镁可 麻醉，以角膜反射减弱为麻醉标准。麻醉成功后，将 降低脑血管痉挛发生率，并可以显著改善预后＿２Ｉ，临 其俯卧于兔台上，剪除颈枕部体毛，由助手协助，稍 床应用治疗ＣＶＳ后ＳＡＨ前景广阔，本研究通过对比 抬起头．下颏稍往后下使头部稍屈曲以便于暴露枕 注药组与对照组实验动物神经功能学测定评分．比 大池．头部固定，保持动物呼吸通畅，安尔碘局部皮 较两组基底动脉平均速率的变化，来探讨硫酸镁对 肤消毒．在颈枕部正中枕外粗隆下约５～ｌＯｍｍ处开 血管痉挛的影响。 始向下切开皮肤约１～１．５ｃｍ长，用血管钳严格从正 １材料与方法 中项韧带小心地钝性分开两侧的肌肉直至能清楚暴 露寰枕连接处，仔细确认寰枕连接处的硬膜，由助手 １．１实验动物与模型的建立 新西兰纯种大白兔１２ 帮助暴露好之后，先用穿刺针对着兔子眼内眦，与切 只，体重为１．８－２．５ｋｇ，兔龄４—６月，雄性，由石河子大 口成３０。的穿刺方式，小心刺破硬膜，有突破感后再 学医学院实验动物中心提供，枕大池二次注血法建 将针头继续深入约１～２ｒａｍ。缓慢回抽出ｌｍｌ的脑脊 液后．再按０．８ｍｌ／ｋｇ从兔耳动脉快速抽取动脉 作者单位：８３２０００石河子大学医学院（郭伟）：石河子 血，并缓慢注入枕大池。然后将俯卧于兔台上的兔子 大学医学院第一附属医院神经外科（王业忠、赵冬、李令建） 保持３０。头低位３０ｍｆｎ，以避免蛛网膜下腔血液扩散 中国现代医药杂志２０１１年１月第１３卷第１期ＭＭＪＣ，Ｊａｎ ２０１１，Ｖｏｌ １３，Ｎｏ．１ ・１７・ 过快，尽量地积聚在基底池附近，同时消毒伤口并予 表２ ＭｇＳＯ 组与ＮａＣ１组基底动脉血流速率均值对比 组别硫酸镁组速率均值（ｃｍ／ｓ）生理盐水组速率均值（ｃｍ／ｓ）Ｐ 缝合伤口。４８ｈ后重复上述过程，注入自体动脉血约 ０．４ｍｌ／ｋｇ．即可获得枕大池二次注血法模型。 １．２ ＴＣＤ检查筛选与动物分组 建模后将受检动物 俯卧于检查台上，由助手协助固定兔头部，使兔头稍 抬起．下颏稍往后下使头部稍屈曲以便于暴露颈枕 部。待动物平静后，应用北京金悦琦科贸有限公司经 颅多普勒血流分析仪，规格型号ＪＹＱ ＴＣＤ一２０００型， 将４ＭＨｚ多普勒超声探头置于颈枕部，仔细耐心地 寻找到基底动脉的血流信号后再不断变化探头方向 及探测深度（＋２ｒａｍ）以获取其最大血流速率。操作中 尽量使动物处于平静状态，动作要轻柔，以避免动物 情绪变化而影响血流速率。根据黄德章同等运用ＴＣＤ 检测的兔基底动脉血流速率数值，血流平均速率＞ ４０ｃｒｒｄｓ，肯定出现ＣＶＳ，筛选出兔８只。随机分为注 ＭｇＳＯ 组与注ＮａＣ１组，按时间点再分为１ｄ，３ｄ，５ｄ， 图１注生理盐水组兔７ｄ时基底动脉的ＴＣＤ频谱 ７ｄ，１４ｄ亚组，每组４只，注药组在模型建造后第１ 天开始肌注２５％硫酸镁注射液ｆ０．３ｍｌ・ｋｇ ・ｄ ），对照 组肌注同等量的生理盐水。 １．３神经行为学评分参照ＫａｏｕｔｚａｎｉＳＤＩ等的神经行为 图２注药物硫酸镁组兔７ｄ时基底动脉的ＴＣＤ频谱 学评分法。评分范同为３—１１分，３分最差。１１分正常 １．４统计学方法 实验数据以Ｙ＋ｓ表示，采用ＳＰＳＳ ｌ７．０软件包对数据用单因素方差分析进行处理，以 Ｐ＜０。０５为有统计学意义，Ｐ＜Ｏ．Ｏ１具有显著性差异 ２结果 ３讨论 蛛网膜下腔出ＩｆＫ（ＳＡＨ）是严重威胁人类生命的 疾病［５Ｊ，是指颅内血管破裂后，血液流入蛛网膜下腔， 神经行为学评分结果，ＭｇＳＯ 组与ＮａＣＬ组１ｄ 时神经行为出现异常，两组之间无统计学意义ｆ尸＞ 脑血管痉挛（ｃｖｓ）是指颅内动脉的一支或多支发生 部分或完全性的狭窄，是蛛网膜下腔出血最常见的 ０．０５），３～５ｄ时加重，７ｄ时最重，１４ｄ有所减轻，自第 ３ｄ起ＭｇＳＯ 组较ＮａＣ１组神经行为异常减轻 ＜ ０．０５）。实验兔ＭｇＳＯ 组与ＮａＣＬ组血流速率均值１ｄ 无明显差异 ０．０５），３～５ｄ时实验兔血流速率均值 并发症，其持续时间长，可造成脑缺血和脑损害．是 增加患者死亡和致残最重要的原因。其发病机制复 杂，内皮素一Ｉ（ＥＴ一１）、溶血产物一氧合血红蛋白、一氧 化氮（ＮＯ）、炎症因子，免疫反应等共同参与，随着分 子生物学技术的发展，对ＣＶＳ发生机制的基因研究 也逐渐深入。有文献报道，在ＳＡＨ后迟发性脑血管 开始走高，至第７ｄ达到最高峰，其后逐渐回落，至 １４ｄ时仍处于较高速率，第３ｄ开始注药组血流速率 较对照组减轻 ＜０．０５），第７ｄ时最具有显著性ｆＰ＜ ０．０１），见表１、２。 表１ ＭｇＳＯ 组与ＮａＣＩ组神经行为学评分对比 痉挛的实验犬中，脑血管内皮细胞及血管平滑肌细 胞（ＶＳＭＣｓ）有凋亡的反生，而且痉挛血管壁组织的 凋亡在血管痉挛形成的机制中有重要作用。而凋亡 受到ＢＣＬ一２家族（ＢＣＬ一２、ＢＡＸ），Ｆａｓ，早期快速反应 基因（ｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙ—ｅａｒｌｙ ｇｅｎｅｓ，ＩＥＣｓ）等多种相关基 因，此外Ｃａｓｐａｓｅｓ家族在ＣＶＳ的细胞凋亡中也 发挥重要作用，有人认为Ｃａｓｐａｓｅｓ抑制剂能明显减 轻血管内皮细胞凋亡、ＣＶＳ、脑水肿、血脑屏障的破 坏，除了凋亡之外应激条件下，应激蛋白的产生也与 ＣＶＳ的发生有关，但是目前不能确定脑血管痉挛如 ・１８・ 中国现代医药杂志２０１１年１月第１３卷第１期ＭＭＪＣ，Ｊａｎ ２０１１，Ｖｏｌ １３，Ｎｏ．１ 何导致了应激蛋白的出现。 目前临床上治疗ＳＡＨ后ＣＶＳ的主要药物是尼 １４ｄ时仍处于痉挛期，整个变化趋势与人蛛网膜下 腔出血后脑血管痉挛的表现相符。对比实验组与对 莫地平，但其价格较为昂贵。镁离－Ｔ：（Ｍｇ ＋）为机体必 照组血流峰值的变化。证实了ＭｇＳＯ 对血管痉挛在 需元素之一。在神经冲动的传递和神经肌肉应激性 ３ｄ起即可产生作用（Ｐ＜０．０５１，７ｄ时最具有显著性 维持方面具有重要作用，也是体内多种酶功能不可 缺少的离子。Ｍ 是维持正常血管功能的重要元素， ０．０１），１４天时仍有疗效。因ＴＣＤ可无创性、连续性的 监测基底动脉血流数值，在本研究中我们避免了处 死实验动物取基底动脉．比较基底动脉管径的传统 的药物疗效评价方式，取而代之的是通过连续、动态 的监测发生ＣＶＳ后实验动物在各个时间点的基底 当细胞内钙离子ｆＣａ２＋１浓度升高到一定水平时平滑肌 细胞强烈收缩，导致血管痉挛，Ｍ 与Ｃａ２ 竞争结合 位点。竞争性抑制Ｃａ 从而阻止血管平滑肌细胞Ｃａ２＋ 内流，防止血管收缩，以减轻血管痉挛。此外，Ｍｇ 对 内皮细胞及内皮细胞衍生舒张因子具有调节作用问。 内皮细胞衍生舒张因子具有松弛血管平滑机，降低 血小板黏附聚集功能，舒张因子减少及内皮细胞损 伤可促发脑血管痉挛。Ｍｇ 对皮细胞衍生舒张因子 具有一定影响，Ｍｇ２＋缺少时可引起血管损伤，并影响 损伤的修复和再生。内皮细胞损伤影响内皮细胞衍 生舒张因子释放，细胞外Ｍｇ 升高可减少血管损伤。 不少学者均在临床或动物实验中指出，安全性高的 镁剂是防治ＳＡＨ后ＣＶＳ的一个很有前景的药物，且 价格低廉。本研究结果显示，自第３ｄ起ＭｇＳＯ 组较 ＮａＣ１组神经行为异常减轻ｆＰ＜０．０５）。第３ｄ开始注药 组血流速率较对照组减轻ｆＰ＜０．０５），第７天时最具有 显著性ｆＰ＜０．０１），证实了ＭｇＳＯ 对ＣＶＳ有缓解作用， 从为ＭｇＳＯ 在临床上治疗ＳＡＨ后ＣＶＳ进一步提供 了实验室依据。 ．ＤＳＡ是目前诊断脑血管痉挛的“金标准”，但其 属于有创操作．插管具有一定难度，成本价较高，易 导致动物死亡．也不易连续性的检测，而应用ＴＣＤ 技术连续或间断的监测脑血流，既无创伤性，又可重 复观测血流变化。本研究结果显示ＣＶＳ后基底动脉 的血流速率随时间渐加快．１～７ｄ时痉挛呈逐渐加重 状态，７ｄ痉挛达到最高峰，其后痉挛程度有所减轻， 动脉血流均值，对比均值的差异，使实验变得简便， 所需实验动物数量大为减少，为评判某种药物对血 管痉挛的疗效，或者两种甚至更多种解痉药物对血 管痉挛疗效的对比提供了更为方便、简洁、高效、低 廉的一种检测途径。 参 考 文 献 １ 高成，刘相轸，刘巍，等．酪氨酸激酶抑制剂对大鼠蛛网膜下腔 出血后脑血管痉挛的用研究叫．中华神经外科杂志，２００６，２２（３）： １７７—１８０ ２ 孔永东，孔繁荣，马晋红，等．镁预防动脉瘤性蛛网膜下腔出血 后脑血管痉挛唧．中华神经外科疾病研究杂志，２１３０８，７（１）：７５—７６ ３ 黄德章，王志刚，丁旋，等．ＤＳＡ和ＴＣＤ对兔蛛网膜下腔出血脑 血管痉挛的评价ｌＪｌ＿中国神经精神疾病杂志，２００８，３４（７）：３９７－ ４０ｌ ４ Ｋａｏｕｔｚａｎｉｓ Ｍ，Ｙｏｋｏｔａ Ｍ，Ｓｉｂｉｌｉａ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｉｎ ａ ｃａｎｉｎｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｓｉｎｇａｌ ａｎｄ ｄｏｕｂｌｅ ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ［Ｊ］．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｅｉ Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９９３，５０（３）：３０１－３０７ ５ Ｒａａｂｅ Ａ，Ｂｅｃｋ Ｊ，Ｋｅｌｌｅｒ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｌａｔｉｖｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｏｆ ｈｙｐｅｒｔｅｎ— ｓｉｏｎ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｈｙｐｅｒｖｏｌｅｍｉａ ｆｏｒ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｏｘｙｇｅｎａ— ｔｉｏｎ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｖａｓｏｓｐａｓｍ ａｆｔｅｒ ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ ｈｅｍｏｒ－ ｒｈａｇｅ［Ｊ］．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ，２００５，１０３（６）：９７４—９８１ ６ 邵美珍．镁的基础与临床【Ｍ】．成都：四川科学技术出版社，１９９６： ２８ （收稿：２０１０—１１—１７）
