｜ 一。 。。 ≯ｌ 癸 ∞誊 鼍鏊嚣臻 ｌ ｔ 鬻 鸡新城疫抗体检测影响因素探讨 李爱英 （晋中职业技术学院，山西晋中摘０３０６００） 要：鸡新城疫是由病毒引起的高度接触性传染病，是严重危 心，使用前要检查一下反应板是否清洁。保持反应板清洁的方法是：检测完后，及时用水进行冲洗反 害养鸡业的重要疾病之一。通过对鸡血清中鸡新城疫抗体水平的 监测能够了解鸡群是否处于容易感染的阶段，也能够判断疫苗接 应板并甩干，ｖ型孑Ｌ的孔底应无任何沉积物，方可干燥后使用，种后是否产生了足够的保护力。但在检测过程中影响试验结果的 如有沉积物，用棉花或纱布蘸水擦洗干净，再用水冲洗，干燥时 因素有很多，如检测时环境的温度、红细胞制备、抗原的效价、 最好翻转反应板以保持孔底无沉积物。使用多次的反应板应用蒸 血清样品的质量、器材的精确性、检测人员的主观因素等，现对 馏水浸泡过夜，对脏的反应板应先用１％盐酸处理，再用Ｉ％火碱 此作一探讨。 关键词：鸡新城疫；抗体检测；影响因素 新城疫，又名伪鸡瘟、亚洲鸡瘟等，是由鸡新城疫病毒引起 的一种急性、高度接触性传染病，常呈败血症经过。主要特征是 呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血，是严重危害养鸡 业的重要疾病之一。在生产实际中，红细胞凝集试验和红细胞凝 集抑制试验是常用的抗体水平检测方法，但在实际操作过程中影 响检测结果的因素有很多，为提高新城疫抗体测定的准确性，现 就鸡新城疫抗体监测中应注意的问题作一探讨。 １红细胞方面 红细胞悬液的制备非常重要。红细胞应采自没有免疫过的成 年公鸡，未成熟的公鸡红细胞较脆弱，易溶血，不能 。红细胞 离心时要控制离心时间和离心速度，配制准确的红细胞悬液。使 用前混匀并不时摇动，用量准确，过多过少均会影响结果的准确 性。 ２抗原的影响 免疫检测是一抗原抗体反应过程，冈此抗原效价需准确标 定。当抗原比较陈旧时，抗原对红细胞的凝集能力下降，凝集后 解凝时间也变短，所以每次测定之前，应准确标定抗原效价。配 制四单位抗原，应根据计算结果用大移液器先吸取生理盐水，然 后用小移液器吸取抗原，抗原吸取前要摇匀，再反复用生理盐水 将移液器吸头里的抗原洗下来，保证配制四单位抗原浓度的准确 性，现配现用。 ３抗体方面 抗体即检测样本。采样的过程中及盛放样本的试管不能污 染，不能含有杂质，不能含有与抗体无关的蛋白质，也不能加抗 凝剂，不能有溶血物。检测样本即被检ｆＩｌＬ清要求足量、新鲜、色 清、无杂质、无溶血现象，且置于清洁无菌的血容器中，否则会 影响检测结果，使结果出现偏差。同时检测时每批样品用生理盐 水和标准阳性 清作阳性和阴性对照，以保证结果准确性。 ４反应板清洁程度的影响 反应板片ｊ的时问长了，洗刷不及时或洗刷不干净，均会影响 结果的准确性，甚至无法判定结果，因此洗刷反应板时一定要细 作者简介：李爱英（１９６６一），女，大学本科，学士学位，曾．医师 晋中职业技术学院畜牧兽医专业实训指导教师。 １ ７６ 处理，最后用自来水漂洗，用蒸馏水浸泡过夜后烘干备用。 ５移液器的影响 移液器在使用前要检查移液器嘴是否拧紧，拧紧后在液体 中反复吸排，吸排量相等、吸嘴内无液体滞留时为准确，若吸头 内有液体滞留，则表明移液器不准。移液器用完后要回到松弛状 态，即拧到最大刻度。在使用过程中，移液器常引起移液量的不 准确，有时吸取的量不够，有时排液量不充分，都影响监测的结 果。 ６操作过程 操作过程中在装配吸头时，要将移液器垂直插人吸头，左右 稍微转动上紧即可，切勿用移液器上下反复撞击吸头来上紧。吸 液时应垂直握住移液器，先预润湿吸头并排空，然后进行正式移 液。 加样时，应将所加液体加在Ｖ型板的底部，避免加到孔壁的 上部，切勿溅出。倍比稀释应注意每孑Ｌ混匀的次数要一致，避免 产生气泡而影响结果的准确性。加４单位病毒液和红细胞悬液时， 要边摇边加入，这样才能保证每孑Ｌ所加的样品量和浓度一致，同 时避免移液器吸头与孑Ｌ内的液体接触，造成各孑Ｌ间液体相互污 染，导致试验结果出现误差。每滴加一种液体要及时更换吸头。 振荡时，振幅不能过大，时间不能过长，以免把红细胞膜振破， 造成溶血。同时熟悉观察结果的标准和时间。 抗体监测试验在室内温度下均可以进行，但是温度不同结果 出现的时间是不同的，２２～２８￣（２条件下最适宜，有条件的可在恒 温箱内进行反应。没有恒温箱的在自然条件下反应也可以，但是 要掌握好观察结果的时间，结果判定一定要快而准。 总之，随着养鸡业的不断发展，鸡新城疫在未来一段时间内 仍是危害养鸡业发展的重要疫病，准确地进行鸡新城疫抗体的监 测在生产中的应用将越来越重要，也会越来越普及，因此对影响 鸡新城疫抗体监测的因素应给予足够的重视，以确保结果的准确 性。 参考文献 ［１ｌ向双云，周珍辉．新城疫抗体测定技能大赛总结…．山东畜牧兽 医．２０１３，（４）：７０—７１． ［２］张永康．影响鸡新城疫ＨＩ抗体检测的因素分析『Ｊｌ＿四川畜牧兽医， ２０１４，（９）：６３．
